在生物工程實驗室中,
磁力攪拌玻璃發酵罐以其結構緊湊、可視化強、操作簡便等優勢,成為小規模細胞培養、微生物發酵和工藝開發的常用設備。它融合了玻璃容器的透明性與磁力驅動的無菌性,是科研人員探索生物反應過程的理想工具。本文將為您詳細介紹其使用方法與關鍵注意事項。
一、標準使用步驟
安裝與檢查
將玻璃罐體平穩放置于加熱磁力攪拌臺上,確保無裂紋或劃痕。放入攪拌子(通常為耐高溫、耐腐蝕的聚四氟乙烯包裹磁棒),檢查進氣口、取樣口、pH/DO探頭接口等是否密封完好。
滅菌處理
將裝有培養基的發酵罐蓋好硅膠塞或透氣膜,采用高壓蒸汽滅菌法(121℃,20-30分鐘)進行滅菌。注意:玻璃罐體可耐高溫,但傳感器和塑料部件需單獨滅菌或后期無菌接入。
安裝傳感器與連接系統
滅菌后,在超凈臺內插入已校準的pH、溶氧電極,連接通氣管路(通常通過空氣過濾器接入無菌空氣或混合氣體),調節氣體流量至合適范圍(如0.1-1.0 vvm)。
啟動攪拌與溫控
打開磁力攪拌器,緩慢調節轉速(通常100-600 rpm),確保液體形成穩定漩渦,促進傳質與混合。設定加熱臺溫度(常用37℃或根據菌種需求),保持恒溫。
接種與培養
通過無菌操作將菌種接入罐內,開始實時監測pH、溶氧、溫度等參數,并根據實驗需求進行補料或調控。
二、關鍵注意事項
避免空載運行:切勿在無液體時開啟攪拌,以防攪拌子撞擊罐底導致玻璃破裂。
控制攪拌速度:過高的轉速可能產生剪切力損傷細胞,尤其對哺乳動物細胞需格外謹慎。
密封與無菌:所有接口需嚴密,定期檢查O型圈是否老化,防止污染。
降溫操作:高溫滅菌后,避免立即接觸冷表面或冷水沖洗,以防玻璃熱脹冷縮破裂。
攪拌子選擇:選用合適尺寸的攪拌子,確保攪拌效率,避免“跳躍”或停滯。
掌握正確使用方法,磁力攪拌玻璃發酵罐將成為您科研路上高效、可靠的“微型生物工廠”。